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对虾白斑综合征病毒的一种现场快速检测方法

发布日期:2022年05月27日 阅读量:

对虾白斑综合征病毒的一种现场快速检测方法

对虾白斑综合症(WSS)是由白斑综合症杆状病毒复合体引发的一种综合性病症。斑节对虾、日本对虾、中国对虾、南美白对虾等都能因感染而患病,甚至病重造成死亡。白斑病病程急,一般有3个阶段,初期:病虾池边游动,拒食,偶尔浮出水面;中期:病虾静窝水底,胃肠空虚,头胸甲和腹甲易被揭开,且不粘连表皮,甲壳上呈现0.5~2㎜的白斑;后期:病虾对外界刺激反应迟钝,大多虾体微红,腹节肌肉略白,血淋巴稀薄不凝固,3~10天内死亡率高达100%。通过WSSV的宿主调查,甲壳动物是主要的传播来源,WSSV主要是水平传播,在对虾养殖区内,病毒通过食物链传播或以海水为媒介进入宿主体内,即由于病虾把带毒的粪便排入水体中,污染了水体或饵料,可以感染健康虾。

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今年上半年以来,全国对虾养殖行业普遍反映病害泛滥成灾,尤其是对虾白斑综合征病毒,对于对虾白斑综合征病毒目前并没有有效的治疗方法,更多的是应对方法是侧重于早期的预防及筛查。7月份,又到了放苗的季节,对于虾苗的选择至关重要,一种快速有效、准确率高的检测方法将大大提升检测机构、种苗企业的工作效率,有效地帮助养殖户规避风险。

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WSSV常用的检测诊断方法主要包括以下几大类:显微镜检测方法、ELISA检测技术和分子生物学检测方法。分子生物学方法具有较高的敏感性和较高的特异性,应用在在WSSV的诊断检测中主要有,如原位杂交、常规PCR、巣式PCR、实时荧光定量PCR等几种方法,但这些方法普遍需要昂贵的仪器设备、专业的实验室以及对检测人员有较高的专业技术,选择送检方式,通常会出现较高的检测费用以及检测周期过长等情况,限制了在养殖场的实际应用。




恒温PCR技术是一种新型的核酸扩增技术,其特点是扩增时间短,特异性强、灵敏度高、检测成本低和操作步骤简单等。该技术针对靶基因的6或8个区域设计4或6条特异引物,增强反应的特异性;利用Bst酶在恒温条件下进行扩增,不需要模板的热变性、长时间温度的循环,极大地缩短了检测时间。扩增产物可以通过染色法肉眼观察,或通过荧光法仪器直接判读,不需要使用凝胶电泳和紫外检测设备,减低了成本。适用于现场的快速检测、基层的普及应用。

由广州双螺旋基因技术有限公司推出的水产病害检测箱,以恒温PCR技术为核心,核心仪器—水产病害检测仪检测对虾白斑综合征病毒、EHP、EMS、哈维氏弧菌、对虾桃拉病毒等水产病害仅需要1~2小时,其操作易学易懂,自动判读检测结果,实现了非专业背景人员的日常检测病害的可能性;仪器小巧便携,可现场检测,满足水产种苗企业、养殖企业、加工企业定期开展水产养殖病害的自检工作。目前,广州双螺旋基因技术有限公司已推出对虾白斑综合征病毒、对虾桃拉综合征病毒、虾肝肠胞虫、哈维氏弧菌、石斑鱼虹彩病毒、草鱼出血病、真鲷虹彩病毒等超过40种水产养殖病害的检测试剂盒,产品在海南、广东、福建、浙江、江苏等地推广应用,广受青睐